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Discussione: USMC FC "Mess Hall"

  1. #101
    Recluta L'avatar di Paolonix
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    PIù che altro bisogna sapere quello di cui si aprla, oltre che a una mente adeguata

    Io conta son riuscito a capire metà delle cose che mi hai detto La mia conoscenza sul corredo genetico, enzimi, proteine, DNA e RNA, duplicazione divisione cellulare etc. si ferma all'applicazione in botanica.
    è gia qualcosa!

  2. #102
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    Ah si! Devo dire che il corredo genetico nei vegetali/piante e tutto ciò che concerne la divisione cellulare (mitosi e meiosi), sintesi proteica, e tanto altro, pur non essendo ciò su cui dovrei metter mano in un futuro (mi vedo con in mano un bel mocho a dividere le mattonelle sporche da quelle pulite) mi interessa/affascina non poco.

  3. #103
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    L'avatar di matt mattock
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    bhe allora un po possiamo capirci, in pratica la procedura era la seguente:
    -prima fase lisaggio di una coltura cellulare di fibroblasti umani in una fiaschetta, prelievo, del lisato, trattamento con vari agenti chimici e varie centrifugazioni ed eliminazione del sovranatante per ottenere il pellets del totale degli RNA
    -controllo tramite gel elettroforesi su agarosio per accertare la presenza degli RNA, quindi ovviamente ottieni bandeggi distinti degli RNA ribosomiali 28s 17s e 5s, e tracce opalescenti degli RNA messaggeri espressi in quel momento dalla cellula, oltre ai tRNA, small nuclear RNA e 4,5svedberg dei complessi di riconoscimento delle SRP.
    -retrotrascrizione mediante enzima trascrittasi inversa degli RNA messaggeri in cDNA a doppio filamento
    -amplificazione mediante PCR con primer specifici disegnati per il cDNA relativo al messaggero per la beta-actina umana (primer dotati di estremità EcoR1 restrizione compatibili)
    -gel elettroforesi per testare la buona riuscita della amplificazione e la non presenza di amplificazioni parassita, recupero con bisturi dell'amplificato, risospensione per centrifuga
    -preparazione dei plasmidi pBlueScript mediante taglio con enzima di restrizione EcoR1, stessa cosa per i cDNA per ottenere estremità sticky coesive
    -gel elettroforesi con controllo per testare l'apertura del vettore plasmidico circolare
    -legatura overnight dei plasmidi con gli inserti preparati
    -preparazione di colture batteriche di ceppi E.Coli mutanti res- e rec- sincrone alla fase logaritmica precoce della crescità in batch
    -trasformazione delle cellule competenti mediante una soluzione trasformante specifica per facilitare l'ingresso di tutti i vettori nelle cellule batteriche (compresi i vettori che si sono richiusi senza inserto)
    -piastraggio su terreni selettivi con ampicillina per eliminare i batteri non trasformati (pbluescript porta il genere per la resistenza all'antibiotico ampicillina)
    -crescita delle colonie ricombinanti overnight
    -prelievo di una colonia controllo dotata di plasmide vuoto e di 3 colonie random trasformate (?) non c'era tempo materiale per fare lo screening mediante sonde marcate radioattivamente, screening per pcr, screening mediante metodo lacZ o altro quindi il quick screening è stato fatto per gel elettroforesi.
    semplificato come una storiella di cappuccetto rosso, 1 settimana di lavoro eheheh
    Zzzz....Ore 01:30... sonnecchio davanti al computer quando casualmente incappo in ciò che è scritto sopra... leggo... biologia molecolare...mi risveglio un pò... sono un pò tanto arrugginito sull'argomento, ma leggendo con attenzione mi ritornano in mente tante cose (il 90% di ciò che hai scritto l'ho capito, frutto di vecchi studi universitari...bei tempi...)
    Purtroppo il metodo qui sopra non funziona proprio per gli equipaggiamenti militari. Ne in vitro ne in vivo.
    Probabilmente sei un biologo/bioingegnere/tecnico di lab che ti occupi di biologia molecolare, giusto?
    Non so se sei più matto tu a scrivere ste cose su un forum di softair il venerdì sera tardi o io che più tardi le leggo e ti rispondo...mah...forse è meglio farci una dormita su... 1 pecora....2 pecore...3 pecore....zzzz...

  4. #104
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    Quote Originariamente inviata da matt mattock Visualizza il messaggio
    Zzzz....Ore 01:30... sonnecchio davanti al computer quando casualmente incappo in ciò che è scritto sopra... leggo... biologia molecolare...mi risveglio un pò... sono un pò tanto arrugginito sull'argomento, ma leggendo con attenzione mi ritornano in mente tante cose (il 90% di ciò che hai scritto l'ho capito, frutto di vecchi studi universitari...bei tempi...)
    Purtroppo il metodo qui sopra non funziona proprio per gli equipaggiamenti militari. Ne in vitro ne in vivo.
    Probabilmente sei un biologo/bioingegnere/tecnico di lab che ti occupi di biologia molecolare, giusto?
    Non so se sei più matto tu a scrivere ste cose su un forum di softair il venerdì sera tardi o io che più tardi le leggo e ti rispondo...mah...forse è meglio farci una dormita su... 1 pecora....2 pecore...3 pecore....zzzz...
    esattamente futuro (spero non troppo anteriore) dottore in biotecnologie ahahah
    il pazzo sono io, non avevo che fare e ho scritto qua a grandi linee quello che avevo fatto in settimana visto che ero stato un po assente nella stanza :P
    Tutti speravamo che avrebbe funzionato almeno in vitro, ho tentato di amplificare un paio di M4A1 ma le cellule batteriche pacifiste erano restie ad acquisire materiale bellico XD

  5. #105
    Vittima sacri****le a RedFoxy In attesa della conferma e-mail L'avatar di Shark86
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    Condivido con voi questa storiella perchè ha del demenziale... Oggi ero a Roma per la parata del 2 giugno con degli amici (eravamo circa 8 persone). Appena finita, io ed un mio amico ci sganciamo dal gruppo per evitare la folla (gli altri si stavano infognando tra le persone), ad un certo punto ci avvicina un signore che sembrava un turista io mi fermo perchè pensavo stesse per chiedermi informazioni quando tira fuori il distintivo e ci fa "mi fate vedere i documenti?". Glieli diamo, questo ci da un occhiata e poi ci fa "venite un attimo", ovviamente mi era presa un pò d'ansia e gli faccio "come mai? è successo qualcosa?" e quello mi fa "sono solo controlli". Ci porta da altri 2 colleghi che si studiano i documenti e annotano qualcosa, quando scoprono che il mio amico è figlio di carabiniere e gli dice "vieni un attimo" e va a parlarci in privato e io resto con gli altri 2. Nel frattempo arrivano gli altri amici tra le risatine perchè pensavano chissà che avessimo fatto, passano altri 2-3 minuti e torna il mio amico ridendo con quel poliziotto e ci fa "scusate ma pensavamo che fosse 2 estremisti di sinistra così vestiti" Questo era il mio abbigliamento: nike shox, pantaloni marpat desert (frog ), maglietta nera diesel, giacca normalissima legata alla vita e baseball cap OD, il mio amico aveva le nike air max, jeans normalissimi e maglietta nera con disegnini... MAH! Ma non solo dopo che ci hanno lasciati andare ho chiesto all'altro che si erano detti e mi fa "mi hanno chiesto da dove venivamo e che orientamento politico avevo, poi ha chiesto di voi perchè erano della DIGOS, hanno avuto una segnalazione su 2 tipi sospetti e li hanno chiamati, ci stavano dietro da un ora aspettando che ci muovessimo e credevano che [testuali parole] fossimo estremisti di sinistra, quelli che lanciano le molotov"... ora... vi pare che gli estremisti di sinistra mettono le nike, magliette nere o pantaloni mimetici americani? Comunque poi ha chiamato il padre che è un pezzo grosso e ci ha detto che non c'è da preoccuparsi però fatto sta che i 15 minuti di ansia ci sono stati... PS: per la cronaca i pantaloni marpat me li ero messi per farmi riconoscere da uno di questi amici perchè ci dovevamo vedere in metro e non era semplice visto la mole di gente che c'era oggi per roma

  6. #106
    Leggenda di SAM
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    Ci sono noglobal che hanno cellulari e mangiano da mcdonalds... quindi non c'è da stupirsi se alcuni estremisti girano con pantaloni di una mimetica, nike e t-shirt (anche perchè dubito che quegli agenti sapessero cosa sia una marpat frog... )

  7. #107
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    Pensa se dicevi che eri di sinistra, quando ti rivedevamo più

    Anche perché., se proprio devo far casino, te pare che vado a dire che sono un militante di sinistra?

  8. #108
    Recluta L'avatar di 'EAVYMETAL
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    mmh, marpat e maglietta nera...tipico abbigliamento sospetto!! ma poi non ho capito, se anche gli avessi detto 'sono di sinistra' cos'è, illegale??

  9. #109
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    Quote Originariamente inviata da 'EAVYMETAL Visualizza il messaggio
    mmh, marpat e maglietta nera...tipico abbigliamento sospetto!! ma poi non ho capito, se anche gli avessi detto 'sono di sinistra' cos'è, illegale??
    no è illegale essere estremisti e belligeranti, e dato che hanno ricevuto una segnalazione, veritiera o meno loro sono tenuti a verificare

  10. #110
    Vittima sacri****le a RedFoxy In attesa della conferma e-mail L'avatar di Shark86
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    Quote Originariamente inviata da Paolonix Visualizza il messaggio
    no è illegale essere estremisti e belligeranti, e dato che hanno ricevuto una segnalazione, veritiera o meno loro sono tenuti a verificare
    Si ma a questo punto alla domanda "voi di che orientamento politico siete?" chi è che va a rispondere "io sono di estrema sinistra e vado a lanciare le molotov a chi non la pensa come me"? è come chiedere all'oste com'è il vino

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